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細胞培養(yǎng)瓶的特點、選擇及細胞時有哪些注意事項!
一般實驗室在使用細胞搖瓶來培養(yǎng)細胞時總會遇到各種各樣的問題,BUSNEN本生今天跟大家分享一下我們在使用細胞搖瓶培養(yǎng)細胞時的注意事項及如何來選擇細胞培養(yǎng)瓶。
懸浮細胞常規(guī)推薦接種密度:3-5×105cell/mL,生長到2×106cell/mL左右可繼續(xù)傳代;該密度建議為理論值,實際按照每個細胞特性有波動;培養(yǎng)懸浮細胞需要穩(wěn)定的生長環(huán)境,少操作,少觀察,更有利于細胞生長;
不建議將聚團的細胞頻繁吹散,等待密度高和狀態(tài)改善時,細胞會自行散開;部分細胞聚團生長為特性,吹散不利于生長,請注意查看相關培養(yǎng)說明;有些細胞本身就是聚團生長(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等),有些細胞本身就形態(tài)不圓(H9等),為正?,F(xiàn)象,無需特殊處理;
豎瓶培養(yǎng)可以促進細胞生長,但由于拿出來觀察時都是橫瓶,觀察久了細胞會貼到底部,觀察完再次豎起來就會有細胞掛在瓶底部,而細胞沒有培養(yǎng)基滋潤很快就會死掉并殘留在壁上,從而導致養(yǎng)著養(yǎng)著細胞越來越少,貼壁細胞越來越多;因此,在培養(yǎng)瓶豎置操作時需注意吹下細胞搖瓶底部的細胞,避免細胞殘留。
作為一種應用廣泛的細胞培養(yǎng)容器,它有哪些特點,我們又該如何選擇呢?
首先,細胞培養(yǎng)瓶由聚苯乙烯原料制成,具有很好的透明度,方便透過瓶體觀察細胞的生長狀況。
其次,這種耗材有TC處理和未TC處理兩種表面,分別適用于貼壁細胞和懸浮細胞的培養(yǎng)。
第三,瓶子采用寬瓶頸設計,接觸無sijiao,方便移液管和細胞刮刀的進入。
第四,瓶子底部留有透氣孔,有利于培養(yǎng)箱內(nèi)部氣體快速進入細胞瓶周圍,縮短細胞瓶從常溫環(huán)境移入的回溫時間。
第五,蓋子有透氣蓋和密封蓋兩種類型,密封蓋適用于密封條件下的細胞和組織培養(yǎng),透氣蓋則適用于開放的培養(yǎng)條件,瓶蓋透氣膜疏水化設計,與液體接觸后不影響透氣膜的密封性和透氣效果。
在選擇細胞培養(yǎng)瓶的時候我們要搞清楚細胞的種類及培養(yǎng)環(huán)境,根據(jù)這兩點來確定是選擇TC處理表面還是未TC處理表面,以及透氣蓋還是密封蓋。最后,根據(jù)細胞培養(yǎng)規(guī)模確定瓶子的規(guī)格。
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